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生物大分子相互作用

所属行业:分子生物学

所属企业:瀚盟生物

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设备或技术:

Biacore 3000/GE 

技术要点:

芯片预处理、偶联蛋白质、结合测试、动力学和亲和力分析

样品要求:

1.通过等电聚焦或者使用软件预测,确定待分析蛋白的等电点。对等电点高于7或者小于3的蛋白一般不推荐进行Biacore分析。2.固定于传感片上的靶蛋白(例如:受体蛋白)和待分析蛋白,纯度要达到95%以上,提供纯度检测的结果图,如SDS-PAGE电泳图片,色谱图等。3.用PBS(或者用户蛋白所需的特殊缓冲液)对蛋白溶液进行透析,然后浓缩至200ug/ml~1mg/ml的浓度。4.列出详细的缓冲液配方,pH值,注明有无添加剂、表面活性剂,还原剂及其浓度等。准备共价偶联于芯片上的样品中,不能含有Tris等带活性氨基的物质。5.注明有无重组标签,GST标签。如果是抗体可以注明抗体的亚型。6.样品来源是指样品是从天然材料中提取得到,还是直接购买(如果是,请提供公司相关的商品信息),重组表达纯化(纯化过程及缓冲液等)。7.样品聚集会影响动力学数据的准确性,请确保样品不是聚合体。8.请说明通过什么实验(如pull down,coIP等)验证样品之间有无结合?9.尽可能多的提供文献报道的相关信息,并尽量提供文献原文。10.小分子化合物要确保可以溶解在含5%DMSO的PBS缓冲液中。

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